北京六一轉印電泳儀是生命科學實驗室常用的儀器之一,一般分為核酸電泳儀和蛋白電泳儀,即我們所說的垂直電泳和水平電泳。一個是做核酸實驗的一個是做蛋白實驗的。電泳儀的組成包括電泳電源、電泳槽以及實驗材料等。
因為半干轉膜的特點是大尺寸電極板利用強電場快轉,但是蛋白質分子量如果太大,運動速度就會減慢,而半干轉膜的緩沖液僅僅是靠著上下濾紙浸潤的緩沖液提供離子。
這時候如果轉膜需要時間太長,容易出現濾紙和膠塊被烤干的情況,導致轉膜結果不穩定,如果實驗室經常需要轉膜這種大分子量蛋白質,但又是希望借用半干轉膜技術縮短時間提升效率。
轉膜時選用加厚的濾紙,并且使用新鮮配置的緩沖液,充分浸泡轉印體系使用;或者使用濕轉槽在充足緩沖液條件下用較長時間轉膜。
穩定的轉膜方式,因為濕轉是將轉印膜與凝膠浸泡在緩沖液中做電轉,所以可以用較小的電流在較長的時間中進行轉膜,外部配置冰盒或者冰箱甚至可以做隔夜慢速濕轉達到適合的轉膜效果。
北京六一轉印電泳儀出現濕轉的結果可重現性不強,常見有兩方面原因:
1、轉膜時間不長,實驗者圖省事沒有加冰盒做降溫,小槽體緩沖液體積太小,溫度升高過快導致液體電阻變化過快,電流不穩定波動導致轉膜結果變動
2、有些實驗室出于經費考慮,要求循環利用緩沖液,緩沖液多次利用后導致有效離子不足,也會影響結果。